葉綠素(Chlorophyll)檢測試劑盒(比色法)
產(chǎn)品簡介：
葉綠體(Chloroplast)是光合作用的細(xì)胞器，在光合作用研究中，常需要用提取的葉綠體展開下游研究工作。葉綠體中所含的色素主要有兩大類，葉綠素(包括葉綠素 a 和葉綠素b)和類胡蘿卜素(包括胡蘿卜素和葉黃素)，它們與類囊體膜上的蛋白質(zhì)結(jié)合，成為色素蛋白復(fù)合體，其中葉綠素又稱葉綠體色素(Chlorophyll)。
葉綠素(Chlorophyll)檢測試劑盒(比色法)檢測原理是葉綠素不溶解于水，而溶于有機(jī)溶劑，以有機(jī)溶劑粗提葉綠素，根據(jù)朗伯-比爾定律，某有色溶液的吸光度(A)與其中溶質(zhì)濃度(C)和液層厚度(L)成正比，即A=αCL，其中α為比例常數(shù)，當(dāng)溶液濃度以百分比濃度為單位，層液厚度為1cm 時(shí)，α為該物質(zhì)的吸光系數(shù)。在本試劑盒情況下，葉綠素a和葉綠素b在 665nm、649nm處有最大吸收波，根據(jù)經(jīng)驗(yàn)公式可計(jì)算出葉綠素 a、葉綠素b及總?cè)~綠素含量。該試劑盒主要用于植物組織中葉綠素的提取以及定量檢測葉綠素a、葉綠素b及總?cè)~綠素含量。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成：
| 產(chǎn)品組成 | 規(guī)格 | Storage |
| 試劑(A): Chlorophyll Assay buffer | 500ml | RT |
| 試劑(B): 提取粉劑 | 3g | RT |
| 使用說明書 | 1份 |
自備材料：
1、研缽或勻漿器
2、離心管
3、濾紙或紗布
4、比色杯
5、分光光度計(jì)
操作步驟(僅供參考)：
1、葉綠素提取：
①取菠菜或其他植物新鮮葉片，洗凈，擦干，去中脈，稱取剪碎的新鮮樣品 0.1g，置于研缽或勻漿器，加入少量提取粉劑(約 50mg)和 1mlChlorophyll Assay buffer，研磨或勻漿成液態(tài)。
②將研磨液或勻漿液轉(zhuǎn)移至 10ml 離心管，用少量葉綠素提取液沖洗研缽或勻漿器數(shù)次，最后連殘?jiān)煌谷?10ml 離心管，補(bǔ)加 Chlorophyll Assay buffer 至 10ml，混勻，避光放置 5min-2h。
③觀察底部組織殘?jiān)咏诎咨�，即為提取完全，如果仍有較多組織顏色，應(yīng)再加入Chlorophyll Assay buffer 繼續(xù)避光放置。
④濾紙或三層紗布過濾，留取濾液，即為葉綠素粗提液。
2、分光光度計(jì)測定：取葉綠素粗提液加入光徑為 1cm 的比色杯，以 Chlorophyll Assay buffer 調(diào)零，測定粗提液在 665nm、649nm 處吸光度(A665、A649)。
計(jì)算：
葉綠素 a 含量(mg/g)=Ca×V×N/(W×1000)
葉綠素 b 含量(mg/g)=Cb×V×N/(W×1000)
總?cè)~綠素含量(mg/g)=CT×V×N/(W×1000)
式中：Ca=13.95×A665-6.88×A649
Cb=24.95×A649-7.32×A665
CT=6.63×A665-18.07×A649
V=葉綠素粗提液體積(ml)=10(ml)
N=稀釋倍數(shù)
W=樣品鮮重或干重(g)
注意事項(xiàng)：
1、 為了避免葉綠素見光分解，操作時(shí)應(yīng)盡量避光，研磨或勻漿時(shí)應(yīng)盡量縮短時(shí)間。
2、 測定吸光度值大于 1 時(shí)，可適當(dāng)稀釋后再行測定。
3、 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期：12個(gè)月有效。
技術(shù)支持: