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人切除修復交叉互補基因1(ERCC1)試劑盒(ELISA) 使用說明書

產(chǎn)品型號:46T

產(chǎn)品產(chǎn)地:山東省青島市城陽區(qū)韓海路青大工業(yè)園

采購熱度:958

產(chǎn)品價格: 1

簡介內(nèi)容:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人切除修復交叉互補基因1(ERCC1)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人切除修復交叉互補基因1(ERCC1)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
訂購熱線:400 9025 885

人切除修復交叉互補基因1(ERCC1)試劑盒(ELISA) 使用說明書

 人切除修復交叉互補基因1ERCC1試劑盒ELISA)

使用說明書

 

 

 

 

 

本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中人切除修復交叉互補基因1ERCC1)的含量。

有效期:6個月

保存條件:2-8℃

 

 

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包人切除修復交叉互補基因1ERCC1)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人切除修復交叉互補基因1ERCC1)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

 

樣本處理及要求

1.  血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?/font>-20℃-80℃保存,但應避免反復凍融。
2.  血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)吮痉庞?/font>-20℃-80℃保存,但應避免反復凍融。
3.  細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?/font>-20℃-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

需要而未提供的試劑和器材

1. 酶標儀(450nm

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水

 

試劑盒組成

名稱

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標板

8×12

8×6

標準品

0.3mL*6

0.3mL*6

樣本稀釋液

6mL

3mL

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說明書進行稀釋

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

終止液

6mL

3mL

封板膜

2

2

說明書

1

1

自封袋

1

1

1.  標準品濃度依次為:8、42、1、0.5、0 ng/mL

2.  經(jīng)過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過最大標準品濃度時,可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。

 

注意事項

1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

2. 洗板不正確可以導致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。

5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。

6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。

7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。

9. 不能使用過期產(chǎn)品。

10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

 

試劑準備

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用。

2洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按120稀釋,即120×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

 

操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃

2.  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL

3.  樣本孔待測樣本50μL;空白孔不加。

4.  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min

5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液350μL,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6.  每孔加入底物A、B50μL37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

 

實驗結(jié)果計算

所測標準品的OD為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關(guān)軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品濃度

 

試劑盒性能

1.  檢測范圍0.25 ng/mL  8 ng/mL。

2.  靈敏度:最低檢測濃度小于0.1 ng/mL。

3.  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應。

4.  重復性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 

原創(chuàng)作者:青島捷世康生物科技有限公司

標簽:人切除修復交叉互補基因1(ERCC1)試劑盒(ELISA) 使用說明書 

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  2、常用試劑備貨充足,除對溫度要求極其嚴格的產(chǎn)品當天可發(fā)貨。
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  4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。
  5、如需代為檢測,標本對環(huán)境溫度高,可聯(lián)系客服安排專人取樣(限省內(nèi)客
       戶)。

  6、代測免收代測費,一周出結(jié)果。
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